人白细胞介素13受体a2 ELISA检测试剂盒
产品名称： 人白细胞介素13受体a2 ELISA检测试剂盒
英文名称： Human IL-13 R alpha 2 ELISA KIT
产品编号： SEKH-0023
产品价格： 0
产品产地： 北京
品牌商标： solarbio
更新时间： 2025-10-28T13:20:45
使用范围： null
北京索莱宝科技有限公司
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Human IL-13 Rα 2 ELISA KIT
品牌：Solarbio | 货号：SEKH-0023
0.15 ng/ml（灵敏度），检测范围：0.3 - 20 ng/ml
背景介绍：
IL-13 主要是由活化Ｔ细胞产生的 12 KD 的多效性细胞因子。人类 IL-13Rα2 基因启动子位于染色体 Ｘｑ１３．１-ｑ２８。人 IL-13 R α2 基因由 1４kb 的 11 个外显子组成，ｍＲＮＡ 全长 1.5 kb。IL-13 Rα2是相对分子为量 56000 的糖基化蛋白，包含 380 个氨基酸。 鼠和人类的 IL-13Ｒα2 蛋白序列有 59％的相似性 。IL-13 Rα1 和 IL-13 Rα2 的胞外区均由 3 个Ⅲ型纤维连接蛋白结构域组成，从氨基末端编号分别为Ｄ１、Ｄ２和Ｄ３，在Ｄ２结构域，４个保守的半胱氨酸残基形成二硫键，在Ｄ３结构域，１个 WSXW模序定位于羧基末端，它们对于配体的正确定位和与受体的结合至关重要。人类的 IL-13 Rα1 和 IL-13 Rα2的胞外区有大约 33％的同源性和 21％的相似性，IL-13 α2 在肾细胞癌、人类神经胶质瘤、艾滋病卡波西肉瘤、人头颈癌、乳腺癌、人小儿脑瘤、卵巢癌、口腔 鳞状细胞癌、肝癌、肾上腺皮质癌、胰腺导管腺癌、溃疡性结肠炎或结直肠癌肠上皮细胞、滑膜成纤维细胞等有高表达。
检测原理：
Solarbio (Solarbio ®) ELISA 试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗人 IL-13 R α2 单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的人 IL-13 R α2 会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗人 IL-13 R α2 抗体，该抗体会与板子上包被抗 体捕获的标准品和样本中的人 IL-13 R α2 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链 霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物 TMB，若反应孔中样 品存在不同浓度的人 IL-13 R α2，则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液 后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450 nm（OD=450 nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的人 IL-13 R α2 浓度与 OD 成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中人 IL-13 R α2 的浓度。
注意事项：
1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。
2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。
3. 试剂盒使用前请在室温恢复 30 min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。
4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。
5. 为避免交叉污染，请在试验中使用 1 次性试管，枪头，封板膜（※）及洁净塑料容器。.
6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶 盖上，使用前请离心处理（5-10 S 即可），使管壁上的液体集中在管底部，取用时，请用移液器小心吹 打几次。
7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的 试剂代替本试剂盒中的某单个组分。
8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。
安全提示：
试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作人员在使用时请带上手套并注意防护；在操作过程中也要避免试 剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量清水清洗；检测血液样本及其它体液样本时，请按国家生物 实验室安全防护有关管理规定执行。
自备实验器材（不提供,可代购）
1． 酶标仪（主波长 450nm,参考波长 630nm）
2． 高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
3． 洗板机或洗瓶
4． 37℃孵育箱
5． 双蒸水,去离子水,量筒等
6． 稀释用聚丙烯试管
样本收集及储存：
1. 细胞培养上清： 将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于 -20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存）,避免反复冻融。
2. 血清样本： 室温血液自然凝固20 min后,在4℃条件下1000×g离心10 min,然后将上清等量分装于小EP管并于-20℃ 下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存）,保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本： 将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检 测可放入 2-8℃储存）,避免反复冻融。
※注意：
血清血浆样本避免使用溶血、高血脂样本,以免影响检测结果；如果样本中的靶标物检测浓度高于 标准品的最高值,请将样品做适当倍数稀释后检测,建议正式实验前做预实验以确定稀释倍数。
试剂准备：
1. 试剂回温：首先在实验前 30 min 将试剂盒，待测样本放置于室温下，浓缩洗涤液如出现结晶，请放入37℃温浴直到结晶全部溶解。
2. 配制洗涤液：预先计算好稀释后的洗涤液使用体积，然后用双蒸水或去离子水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成 1 倍应用液，未用完的浓缩洗涤液放入 4℃冰箱保存。
3. 标准品梯度稀释：加入标准品/样本稀释液（SR1）1ml至冻干标准品中，静置15分钟待其完全溶解后轻轻混匀(浓度为10000pg/ml)，然后在其余七管中各加入500L标准品/样本稀释液（SR1），按照以下浓度
进行2倍稀释：10000、5000、2500、1250、625、312、156、0 pg/ml进行稀释。10000pg/ml标准曲线最高点浓度，标准品/样本稀释液（SR1）作为标准曲线的零点（0pg/ml）。复溶过的标准品原液（10000pg/ml）
未用完的应废弃或根据需要按照一次用量分装，并将其贮存在-20～-80℃冰箱，具体如下图。
4. 生物素化抗体工作液：预先计算好试验所需用量，用检测稀释液（SR2）将100倍抗体浓缩液稀释成1倍应用工作液（稀释前充分混匀），请在30分钟内加入到反应孔中。
5. 酶结合物工作液：按每次试验所需用量配制，用酶结合物稀释液（SR3）将100倍浓缩酶结合物稀释成1倍应用工作液（稀释前离心），请在30分钟内使用。
6. 洗涤方法：
自动洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，注入洗涤液为 300ul/孔,注与吸出间隔为 30 秒，洗板 5 次。
手工洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，用洗瓶加入洗涤液 300ul/孔，静止30 秒后甩净酶标板孔中液体，在厚迭的吸水纸上拍干，洗板 5 次。
结果判断：
1.用酶标仪 450 nm 波长测定 OD 值。选择双波长检测，参考波长为 630 nm。如不能进行双波长检测，请用 450 nm 的 OD 测定值减去 630 nm 的 OD 测定值。
2.计算标准品、样品的平均 OD 值：每个标准品和标本的 OD 值应减去零孔的 OD 值
3.以标准品浓度为横坐标，吸光度OD值为纵坐标，用软件绘制标准曲线，样品中IL-13 R Α2含量可通过对应OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
4.若标本 OD 值高于标准曲线上限，应做适当稀释后重新检测，计算浓度时再乘以稀释倍数。